液氮研磨法

简介

液氮研磨应用于有关脱氧核糖核酸(DNA)分离原理

分子生物学是当前生命科学领域的前沿学科,其理论与技术已渗透到各学科领域,而分子生物学实验在生命科学研究中显得相当重要。在实际工作中,许多实验材料比如动物身上的肌肉组织、结缔组织、骨组织、毛发组织等,植物的根、茎、叶、种子等均需磨碎,随后才能对其成分、基因与蛋白质及结构和功能进行研究。

液氮研磨在分子生物学实验中应用广泛,特别是有关核糖核酸(RNA)、脱氧核糖核酸(DNA)的分离。液氮的温度为一196℃,它既能使各种组织成分不易被破坏或降解,又能使组织变硬,脆性增加易于磨碎。正是由于液氮的温度极低,操作时要特别小心。液氮研磨，一是为了终止细胞内外一切生物反应，比如提取RNA时，防止RNA酶的降解反应等；还有一个原因，就是在液氮中的细胞完全冻硬了，研磨可以达到很好的破胞效果，将细胞磨成粉，使里边的物质释放出来。应用

核糖核酸(RNA)、脱氧核糖核酸(DNA)的分离来源：丁香实验

操作方法

液氮研磨法液氮容器的准备液氮一般保存于液氮罐中。实验前先准备一个保温桶,将适量液氮转移至保温桶中,同时还要准备一个不锈钢或塑料汤勺,汤勺的柄不够长时要想办法加长,以免冻伤手。组织的处理及用量任何组织在获得后如不立即使用,要尽快保存在低温环境中(一196℃液氮中速冻,一70℃保存)。使用时,植物组织应当先用自来水清洗外表的泥沙,用单蒸水冲洗两遍,用75%乙醇浸洗约30秒,再用灭菌双蒸水冲洗两遍,用无菌滤纸吸干